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上海哈靈生物科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA代測(cè)服務(wù),ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒,ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),大鼠ELISA試劑盒

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無(wú)血清非程序凍存液(即用型)操作說(shuō)明

2026-1-23  閱讀(24)

無(wú)血清非程序凍存液(即用型)操作說(shuō)明

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
規(guī)格1
規(guī)格2
規(guī)格3
儲(chǔ)存條件
運(yùn)輸條件
YYX180438
無(wú)血清非程序凍存液
10 mL×5
50 mL
100 mL
2-8°C,保質(zhì)期12個(gè)月
冰袋運(yùn)輸
(附:產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份)

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

在細(xì)胞體外培養(yǎng)工作中,為實(shí)現(xiàn)細(xì)胞生物活性的長(zhǎng)期保存,需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷凍處理,待實(shí)驗(yàn)需求時(shí)復(fù)蘇培養(yǎng)。目前液氮冷凍保存法應(yīng)用廣泛,核心是通過(guò)添加適宜保護(hù)劑使細(xì)胞緩慢降溫,從而達(dá)到保護(hù)效果。
語(yǔ)燕生物研發(fā)的該款無(wú)血清非程序凍存液,特別添加細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑,可延緩凍存過(guò)程中細(xì)胞沉降速率,避免細(xì)胞擠壓影響凍存質(zhì)量;同時(shí)復(fù)配細(xì)胞膜保護(hù)劑、滲透性與非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑,通過(guò)水合作用弱化水結(jié)晶過(guò)程、增加溶液粘性,顯著減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷,大幅提升細(xì)胞復(fù)蘇存活率。
產(chǎn)品配方成分明確,不含血清及動(dòng)物源性蛋白,有效降低細(xì)菌、病毒、支原體等污染風(fēng)險(xiǎn),保障凍存細(xì)胞安全。適用范圍廣泛,涵蓋常規(guī)細(xì)胞系、原代細(xì)胞,亦適配無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞與蛋白表達(dá)細(xì)胞。
相較于傳統(tǒng)凍存液,本品無(wú)需繁瑣程序凍存步驟及昂貴程序降溫儀,細(xì)胞重懸后可直接置于-80°C超低溫冰箱長(zhǎng)期保存(需保證溫度穩(wěn)定);若需更長(zhǎng)期穩(wěn)定保存,可將凍存管于-80°C超低溫冰箱過(guò)夜(>16 h)凍存后,轉(zhuǎn)移至液氮罐存放。

二、產(chǎn)品特點(diǎn)

  1. 即用型設(shè)計(jì),隨取隨用,2-8°C條件下可穩(wěn)定保存1年以上,無(wú)需提前制備;

  2. 省去程序凍存流程與程序降溫儀投入,直接放入-80°C超低溫冰箱即可,節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間與人力成本;

  3. 細(xì)胞復(fù)蘇率可達(dá)90%以上,適配多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞凍存需求;

  4. 無(wú)血清配方,批次間差異小,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性更優(yōu);

  5. 可有效維持干細(xì)胞多向分化潛能,滿足特殊細(xì)胞培養(yǎng)研究需求;

  6. 化學(xué)成分明確,無(wú)外源蛋白添加,既減少污染機(jī)會(huì),又避免外源蛋白對(duì)細(xì)胞正常生長(zhǎng)分化的干擾。

三、使用說(shuō)明

(一)細(xì)胞凍存

  1. 選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞(匯合度約90%),凍存前24 h內(nèi)完成換液,收集細(xì)胞并制備成單細(xì)胞懸液(貼壁細(xì)胞需用消化),計(jì)數(shù)確保細(xì)胞活率>90%;

  2. 將細(xì)胞懸液以1000 r/min離心5 min,棄去上清液;

  3. 向細(xì)胞沉淀物中加入本品,輕輕吹打混勻,調(diào)整細(xì)胞密度至2-5×10?個(gè)/mL;

  4. 按0.5 mL或1.0 mL/管的量,將細(xì)胞懸液分裝至無(wú)菌凍存管,擰緊管蓋并做好清晰標(biāo)記;

  5. 直接將分裝完畢的凍存管移入-80°C超低溫冰箱,確保冰箱溫度穩(wěn)定;

  6. 如需長(zhǎng)期穩(wěn)定保存,可經(jīng)-80°C超低溫冰箱過(guò)夜(>16 h)凍存后,轉(zhuǎn)移至液氮罐中長(zhǎng)期存放。

(二)細(xì)胞復(fù)蘇

  1. 將水浴鍋預(yù)熱至37°C,佩戴一次性PE無(wú)菌手套,在無(wú)菌離心管中加入9 mL預(yù)熱好的無(wú)菌培養(yǎng)基;

  2. 從液氮罐中取出凍存管,迅速放入PE手套中并浸入37°C水浴鍋,輕輕搖晃加速溶解,力爭(zhēng)1分鐘內(nèi)融解。        小貼士:若液氮罐與水浴鍋距離較遠(yuǎn)(步行超過(guò)1 min),需先將凍存管置于干冰上轉(zhuǎn)運(yùn),避免溫度回升產(chǎn)生冰晶損傷細(xì)胞;凍存管裝入PE手套可預(yù)防污染,融解過(guò)程需快速高效,建議同步使用計(jì)時(shí)器;若1分鐘內(nèi)未融解,可能因凍存液量過(guò)多或搖晃力度不足,需及時(shí)調(diào)整。

  3. 在超凈工作臺(tái)內(nèi),將復(fù)蘇后的細(xì)胞液移入裝有新鮮培養(yǎng)基的離心管,以1200 rpm離心3 min,棄去上清;

  4. 用對(duì)應(yīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至無(wú)菌培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿,補(bǔ)充適宜量培養(yǎng)基后,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

四、產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件

  1. 本品需在2-8°C避光環(huán)境下保存,有效期1年;為保障凍存效果,嚴(yán)禁凍融本品,避免影響成分活性;

  2. 請(qǐng)?jiān)诒Y|(zhì)期內(nèi)使用,過(guò)期產(chǎn)品請(qǐng)勿使用,以防降低細(xì)胞復(fù)蘇存活率。

五、注意事項(xiàng)

  1. 本品經(jīng)3次0.22 μm過(guò)濾除菌處理,使用全程需嚴(yán)格無(wú)菌操作,杜絕污染;

  2. 操作時(shí)請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服及一次性手套,保障自身安全與健康;

  3. 凍存管分裝完成后,減少室溫/4°C環(huán)境存放時(shí)間,盡快移入-80°C超低溫冰箱,且需確保冰箱溫度穩(wěn)定;

  4. 凍存管蓋務(wù)必?cái)Q緊,防止液氮滲入,避免復(fù)蘇時(shí)發(fā)生凍存管炸裂;

  5. 針對(duì)敏感細(xì)胞系、珍貴細(xì)胞系、原代細(xì)胞樣本凍存,建議使用前行1周以上的凍存測(cè)試,確認(rèn)無(wú)異常后再正式凍存;

  6. 本品為語(yǔ)燕生物科研專用產(chǎn)品,僅用于科研實(shí)驗(yàn),不可用于診斷、治療、臨床及其他非科研用途。

16 h)凍存后,轉(zhuǎn)移至液氮罐存放。




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