非洲豬瘟pcr檢測(cè)儀的工作原理是什么

【資料簡(jiǎn)介】

　　非洲豬瘟pcr檢測(cè)儀的工作原理是什么?【JD-CW16H】，【山東競(jìng)道光電，十年儀器廠(chǎng)家】，非洲豬瘟PCR檢測(cè)儀器的工作原理基于PCR技術(shù)。PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)，是一種利用酶促反應(yīng)擴(kuò)增和檢測(cè)特定DNA片段的技術(shù)。其基本過(guò)程可分為取樣、DNA擴(kuò)增、PCR產(chǎn)物檢測(cè)和結(jié)果分析幾個(gè)步驟。

　　在非洲豬瘟PCR檢測(cè)中，首先需要采集豬體液或組織樣品，從中提取出潛在存在的非洲豬瘟病毒DNA。然后，將提取的DNA加入PCR反應(yīng)管中，同時(shí)添加引物和酶，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

　　引物是設(shè)計(jì)成與非洲豬瘟病毒的特定DNA片段互補(bǔ)的DNA片段。通過(guò)引物的定向作用，擴(kuò)增出至少1個(gè)特定的非洲豬瘟病毒DNA片段。酶的主要作用是協(xié)助引物將DNA分子拆開(kāi)，并將分離的單鏈基因組DNA互補(bǔ)配對(duì)連接成可以被擴(kuò)增的新雙鏈DNA。PCR擴(kuò)增過(guò)程主要分為三步：變性、退火和延伸。

　　在變性步驟中，將PCR反應(yīng)管中的混合物加熱至95℃，使基因組DNA雙鏈分離成單鏈。此時(shí)引物結(jié)合到DNA片段的相應(yīng)端部，等待下一步退火。

　　在退火步驟中，溫度被降低至適合引物與目標(biāo)DNA序列雜合的一定溫度(通常為50℃-60℃)。此時(shí)引物與單鏈目標(biāo)DNA雜合，形成引物-DNA雜交物。

　　在延伸步驟中，溫度被升高至72℃。此時(shí)，添加的熱穩(wěn)定synthase DNA聚合酶(Taq)酶沿著分離開(kāi)來(lái)的引物向3’端延伸合成新DNA鏈。這個(gè)過(guò)程將不斷重復(fù)，PCR過(guò)程中不斷擴(kuò)增產(chǎn)物，根據(jù)PCR循環(huán)的次數(shù)和閾值判斷非洲豬瘟病毒是否存在。

　　后，利用凝膠電泳、實(shí)時(shí)PCR或其他分析方法檢測(cè)PCR產(chǎn)物，確定擴(kuò)增的DNA是否明確表明非洲豬瘟病毒存在。

　　需要注意的是，PCR技術(shù)通常需要高度精密的儀器和試劑，操作過(guò)程也要求高度的嚴(yán)謹(jǐn)和無(wú)菌環(huán)境。同時(shí)，PCR結(jié)果只能說(shuō)明樣品中存在非洲豬瘟病毒DNA序列，不能確定樣品是否真正感染了非洲豬瘟病毒。因此，需要結(jié)合其他檢測(cè)技術(shù)和相關(guān)臨床癥狀進(jìn)行綜合判斷。