猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA試劑盒說明書

【資料簡介】

猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA試劑盒僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定猴血清，血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）含量。
猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA試劑盒實驗原理：
        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）水平。用純化的猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3），再與HRP標記的腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）含量。

猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3（TRAIL-R3）ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。