大鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL）ELISA試劑盒供應(yīng)商

【資料簡(jiǎn)介】

 

 

大鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL）ELISA試劑盒供應(yīng)商

 

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）水平。用純化的大鼠核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體（ RANKL），再與HRP標(biāo)記的核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）濃度。

 

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

800 pmol/L	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400 pmol/L	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pmol/L	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pmol/L	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 pmol/L	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

 

大鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL）ELISA試劑盒供應(yīng)商相關(guān)產(chǎn)品：

 

Anti-WEE1 protein  WEE1蛋白抗體
Anti-WNK4（Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4）  一種新的*/*激酶家族成員的基因WNK4抗體
Anti-WNK3 protein（Serine/threonine-protein kinase WNK3）  */*激酶家族成員的基因WNK3抗體
Anti-Wnt1  信號(hào)通路Wnt1抗體
Anti-WDR26/MIP2   心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體
Anti-Wnt3a  信號(hào)通路Wnt3a抗體
Anti-WIP1（WPP-DOMAIN INTERACTING PROTEIN 1）  原癌基因WIP1抗體
Anti-WNT9A/WNT14（wingless-type MMTV integration site 9A）  信號(hào)通路Wnt9a抗體
Anti-WNT2B  信號(hào)通路Wnt2B抗體
Anti-WNT（wingless-related MMTV integration site ）  信號(hào)通路Wnt抗體
Anti-WNT10A（wingless-type MMTV integration site family, member 10a）  信號(hào)通路WNT10A抗體
Anti-WRCH-1（Wnt-1 responsive Cdc42 homolog 1）  WRCH1抗體
Anti-WWOX （WW domain-containing oxidoreductase）  包含氧化還原酶的WW域抗體
Anti-YBX-1（Y box-binding protein1）  高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體
Anti-YERSINIA PESTIS, mouse monoclonal antibody  鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體
Anti-XIAP（X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein）  X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體
Anti-YY1（Yin Yang1）  核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體
Anti-XAF1（XIAP-associated factor 1）  XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體
Anti-XRCC1（X-ray Repair Cross Complementing 1）  X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗體
Anti-XBP-1（X box binding protein 1）  細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X(jué)盒結(jié)合蛋白抗體
Anti-ZAP-70（zeta-associated protein 70）  zeta相關(guān)蛋白70抗體

 

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