人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書

【資料簡介】

全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得的實驗結(jié)果，在取樣 2h內(nèi)進(jìn)行實驗，樣品存放時間越長，細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過6h后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。本實驗不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細(xì)胞分離效果。.吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。分離液用量大于組織單細(xì)胞懸液樣本時，分離效果更佳。.如實驗后細(xì)胞得率或活性過低，請上海研謹(jǐn)生物以獲得和幫助。

人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書【儲存條件及有效期】
18-25℃保存，有效期 2年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
本實驗淋巴細(xì)胞提取率及純度大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書【相關(guān)實驗技術(shù)方案】

1.組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)。
2.所獲得淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。
3.所獲得淋巴細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。
4.所獲得淋巴細(xì)胞的鑒定方法
A.流式細(xì)胞技術(shù)
B.免疫組化技術(shù)
C.原位雜交技術(shù)
D.PCR技術(shù)
注：上述技術(shù)方案詳情請登陸上海研謹(jǐn)生物科技公司搜索“細(xì)胞分離、
純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊”，并在說明書項目欄下下載使用。
人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書【可能存在的問題及解決方法】
1.由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：

2.本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地
區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對離心條件進(jìn)行調(diào)整時，恒定離
心時間，對離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。
3.本分離液依照標(biāo)準(zhǔn)，全部使用藥用級原料，性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注：在對離心條件進(jìn)行調(diào)整時，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g為基數(shù)，直至達(dá)到分離效果，
離心力zui小不得小于 400g，zui大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min為準(zhǔn)。